十二神将乃药师法门的护持者。十二神将又称十二药叉大将或十二神王。在《药师琉璃光如来本愿功德经》里有载:「此十二药叉一一各有七千药叉以为眷属。依佛典所载，这十二神将在昼夜十二个时辰，及四季十二个月份里，轮流率领眷属守护众生。有趣的是，这十二神将从最后的毘羯罗大将起，到最初的宫毘罗大将为止，其守护众生的时辰，刚好是从子时到亥时的十二地支。而且其形象也都与我国民间流传的十二生肖有关，毘羯罗大将戴鼠冠，招杜罗大将戴牛冠，一直到最初的宫毘罗大将，则是头戴猪冠，其次序与十二生肖完全吻合。
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十二药叉解说：
宫毗罗大将 猪
宫毗罗(梵语:Kumbhira)天空
又作金毗罗，意译为极畏;其义是「金头」或「威如王」、威光闪烁而名。宫比罗其义是「蛟龙」、金龙身首而名。此大将的本地为弥勒菩萨，是亥时之守护神。通身赤红色，现忿怒形，头戴猪冠，右手执大刀横于头上，左手开掌当腰。
伐折罗大将 狗
伐折罗(梵语:Vajra) 勾陈
又作跋折罗，和耆罗，其义是「金刚」，此尊手执金刚杵面带笑容且长寿童颜而名。此大将的本地为大势至菩萨，是戍时之守护神。通身青色，现忿怒形，头发茂盛耸上，头戴狗冠，右手持剑，左手作拳当腰。
迷企罗大将 鸡
迷企罗(梵语:Mihira/Mekhila) 朱雀
又作弥去罗，意译为执严。此大将的本地为阿弥陀佛，是酉时之守护神。通身黄色，现忿怒形，头戴鸡冠，右手持独钴，左手作拳押下腹部。
安底罗大将 猴
安底罗(梵语:Andira/Antira) 太常
又作额你罗、安奈罗、安陀罗，意译为执星;其义是「破空山」或「能持」或「多闻」，此尊因为住持十山(多山)常闻佛法，有大名闻而得。此大将的本地为观世音菩萨，是申时之守护神。通身赤红色，现大忿怒形，头戴猴冠，右手屈肘于右胸前开掌向前，屈左手，开掌，掌上放宝珠。
頞你罗大将 羊
满你罗(梵语:Majira/Anila) [阿尼罗]太阴
又作额尔罗、末尔罗、摩尼罗，意译为执风。其义是「沉香」、「密香」、「如意珠」、或「离垢宝」，此尊香光庄严、身净如珠宝而名。此大将的本地为摩利支天，是未时之守护神。通身白色，现忿怒形，头发上耸，头戴羊冠，右手执箭羽，左手持矢根，将此箭弯成弓形。
珊底罗大将 马
珊底罗 (梵语:Sandira/Samthila) 玄武
又作娑你罗、素蓝罗，意译为居处。其义是「螺女」、「石女」、或「花鬘」，此尊是女相，现螺女形之身、首戴花鬘、发形如螺石而名。 此大将的本地为虚空藏菩萨，是午时之守护神。通身赤红色，现忿怒形，头戴马冠，右手把三股戟，左手持螺具。
因达罗大将 蛇
因达罗(梵语:Indra/Indala) 腾蛇
又作因陀罗，意译为执力。其义是「能天主」、「持山」、或「地持」，此尊在天界及人间能为天帝护持山地而名。此大将的本地为地藏菩萨，是巳时之守护神。通身赤色，头戴蛇冠，右手屈肘开掌，置于眉前，左手执三股戟。
波夷罗大将 龙
破夷罗 (梵语:Pajra/Payila) 青龙
又作婆耶罗，意译为执饮。其义是「鲸鱼」或「幻术」，此尊其身形长大如鲸，具有大幻术而名。此大将的本地为文殊菩萨，是辰时之守护神。身呈红色，容貌忿怒，头戴龙冠，右手屈臂，作拳携矢，左手持弓。
摩虎罗大将 兔
摩虎罗(梵语:Makura/Mahala) 天后
又作薄呼罗，意译为执言。其义是「蟒龙行」或「腹行」;另名摩休罗，其义是「大戏乐」或「执日行」;此尊同与龙、蟒、执日戏乐而名。此大将的本地为药师如来，是卯时之守护神。通身青色，稍作忿怒相，头发赤色上耸，头戴兔冠，右手做拳当腰，左手持斧。
真达罗大将 虎
真达罗(梵语:Sindura/Cindala) 白虎
又作新达罗，意译为执想。其义是「一角」或「疑神」，此尊因头生一只角，人见必起疑而名。 此大将的本地为普贤菩萨，是寅时之守护神。现笑怒容貌，身呈黄色，头戴虎冠，右手捧宝珠，左手把宝棒。
招杜罗大将 牛
凯杜罗(梵语:Catura/Caundhula)六合
又作朱杜罗，意译为执动。其义是「严帜」或「杀者」;另名照头罗，其义是「月光」或「月色」;此尊威严时若杀者，清和时犹如月色一样而名。 大将的本地为金刚手菩萨，是丑时之守护神。通身全白色，现忿怒形，头戴牛冠，右手把横剑，左手开掌执剑尖。
毗羯罗大将 鼠
毗羯罗(梵语:Vikarara/Vikala) 天一
毗羯罗意译为圆作，其义是「善艺」或「寻伺」;又名毘伽罗，其义是「字本」或「声教」;此尊擅长广寻善艺，专教「半满字」而名。 此大将的本地为释迦牟尼佛，是子时之守护神。通身青色，现忿怒形，头戴鼠冠，右手下垂持三钴或宝轮，左手作拉右袖之形态。
